Рассчитайте количество реактивов, необходимое для проведения 15 исследований согласно приведенному протоколу – использование двухступенчатого градиента для разделения моно- и полинуклеарных - вопрос №3555975

клеток: 1. Цельную гепаринизированную кровь проинкубировать в течение 40 минут при комнатной температуре. 2. Собрать образовавшуюся лейковзвесь и наслоить на растворы градиента (1,120 г/см3 и 1,080 г/см3) в соотношении 1:1:2. Центрифугировать при комнатной температуре в течение 40 минут при 1500 об/мин 3. Отобрать образовавшиеся слой плазмы, кольцо мононуклеаров и градиент. Собрать кольцо нейтрофилов в новую чистую пробирку. 4. Оставшиеся эритроциты разрушить гипотоническим лизисом (см. ниже). 5. Полученные клетки дважды отмыть раствором Хенкса (без Са2+ и Мg2+), каждый раз центрифугируя в течение 10 минут при 1500 об/мин. 6. Отмытые от эритроцитов и градиента клетки ресуспендировать в бессывороточной среде RPMI-1640 или другом требуемом для исследования буфере.

декабрь 13, 2019 г.